医学论文：TFPI-2与急性髓细胞白血病的研究进展

医学论文：TFPI-2与急性髓细胞白血病的研究进展

Research progress of the relationship between TFPI-2 and the acute myelocytic leukemia
【摘要】：组织因子途径抑制物2 ( t issue factor pathway inh ibitor-2, TFP I-2) 是一种丝氨酸蛋白酶抑制物, 可抑制包括纤溶酶、胰蛋白酶、MM P s 在内的多种蛋白酶, 其在纤溶、伤口愈合、血管生成, 以及肿瘤细胞浸润转移等一系列病理生理过程中发挥重要作用 。急性髓细胞白血病，临床上表现为贫血、发热、出血、感染。预后不良。本文就TFPI-2的结构及调控，TFPI-2与急性髓细胞白血病细胞的凋亡、血管生成、凝血机制等方面的研究进展做一论述。
【Abstract】Tissue factor pathway inhibitor-2 ( TFPI-2) is a matri*-associated Kunitz-type domains serine protinase inhibitor,it negatively regulates the enzymatic activity of trypsin and plasmin and a variety of protease includ MMPS.Acute myelocytic leukemia is hard to cure, which clinical manifestation are anemia and fever and bleeding and infection .This paper is talk about the structure and regulation of TFPI
……（新文秘网https://www.wm114.cn省略1230字，正式会员可完整阅读）……　
肿瘤细胞的生存、侵袭、及内外扩张起重要作用[10].有研究报告示：TFPI-2有抗侵袭作用，通过抑制血纤维蛋白溶酶（激活蛋白酶细胞外基质的降解。）和肿瘤细胞侵袭。一些肿瘤细胞稳定的转染了TFPI-2基因后不易被侵袭，[ 16-17]尽管许多肿瘤细胞是无性生殖，而且肿瘤细胞巨大的异型性表示肿瘤增值与基因和外部因素都有关系，与环境还相关，细胞因子促进肿瘤细胞生长，表达细胞特有体征。[ 18]现在假设，基因不同和DNA超甲基化将导致TFPI-2含量在肿瘤细胞中下降。
2　TFP I-2的组织来源和组织分布
TFP I -2是存在于正常人血浆中的单链糖蛋白，由多种细胞分泌，大部分来自胎盘合胞体滋养层和ECM中的内皮细胞。内皮细胞、平滑肌，成纤维细胞、膀胱上皮细胞也可分泌。[19-20]TFP I-2 广泛分布于人类肝、胰腺、肾、心、骨骼肌、前列腺和胎盘组织, 以及脐静脉上皮细胞、血管内皮细胞等。其抑制胰蛋白酶，血纤维蛋白溶酶、糜蛋白酶、组织蛋白酶G、.血浆激肽释放酶和组织Ⅷ释放物。而对UPA,TPA,凝血酶素作用不明显。有研究报告表明，它在一些侵袭性肿瘤中呈低表达。包括绒毛膜癌，神经胶质瘤，前列腺癌，人黑色素细胞瘤和骨纤维肉瘤。TFPI-2在正常血浆中浓度为225 mmo l/L , 大部分与脂蛋白结合, 包括低密度脂蛋白、高密度脂蛋白和脂蛋白(a).在体内TFP I22的分布70%～75%与ECM结合,这些结果目前已经通过电子显微镜观测到; 25%～30%与细胞结合,只有极少量(0～2% )存留在某些特殊的介质中 。在人体循环的血液中,只有极少的TFP I-2(13～15pmol)能被检测到,当静脉注射肝素后,血中的TFPI-2的含量会明显的提高[ 20-23]
3 TFPI-2与一些恶性肿瘤侵袭性关系研究
3.1 乳腺肿瘤 Yifeng Lin[ 24--25]等发现TFPI-2的MRNA和蛋白质在乳腺癌MDA-MB-435细胞株中检测不出，进一步研究TFPI-2在乳腺癌细胞中的表达途径，TFPI-2的1.5Kb段被克隆，并且检测TFPI-2基因的不同片段，启动子的荧光素酶的活动不被启动子区域点突变影响，而受基因片段缺失的影响。数据分析，TFPI-2启动子区域有个潜在的KLF6结合位点，通过亚硫酸氢钠修饰序列显示出来。[26]TFPI-2启动子区域的CpG 岛结构在MDA-MB-435细胞中被甲基化，最后用EMSA 和ChIP检测，CpG岛结构在KLF-6结合位点甲基化限制KLF6与TFPI-2启动子区域的结合。FPI-2启动子区域的CpG 岛结构在乳腺癌细胞株出现甲基化，而整个启动子区域DNA的甲基化引起TFPI-2基因的通过没有活性的染色体结构表达，TFPI-2基因在乳腺癌细胞中的低表达是由于KLF -6结合位点的CpG二核苷酸异常甲基化。
3.2 神经母细胞瘤 美国伊利诺伊州大学医学院发现TFPI-2是一种大量存在于ECM中的蛋白酶类抑制物，并且在正常细胞中高表达，但是在神经母细胞瘤细胞中低表达或者不表达。[27]研究者使用重组腺相关病毒载体将TFPI-2转染到神经母细胞瘤细胞U-251中，提高TFPI-2在神经母细胞瘤细胞的含量将有效地阻止肿瘤细胞的增值，血管生成和肿瘤侵袭。初步研究表明TFPI-2通过蛋白酶介导的信号通路导致细胞凋亡。[27]TFPI-2可通过细胞内外caspase介导的促凋亡信号通路促使U-251细胞凋亡。通过TUNEL和FACS方法检测转染TFPI-2的神经母细胞瘤细胞U-251，检测蛋白酶3和蛋白酶9显示被转染后的细胞增强凋亡。
3.3 宫颈癌 Qiao Zhang，等发现随着宫颈癌细胞的增长，TFPI-2值曾下降趋势。他们的研究包括12组宫颈鳞状上皮细胞，48组宫颈上皮内瘤样病变细胞。[28]68组宫颈癌细胞，用免疫组织化学染色检测TFPI-2, Ki-67和VEGF。AI用TUNEL检测，结果显示随着宫颈癌细胞的增值TFPI-2的含量下降，并且和FIGO水平，淋巴结转移，HPV感染有关。另外TFPI-2的量与AI曾正向关系(P = 0.004)。相反的，TFPI-2的量与VEGF 或者 MVD曾负向关系（p < 0.001)。[29]TFPI-2的含量与宫颈癌细胞凋亡和血管新生密切相关。TFPI-2将在宫颈癌的发展中起抑制作用。
3.4 白血病 许云等应用脂质体介导的基因转移技术将TFPI-2基因导入人白血病细胞株K562中，采用G418选出带有表达载体的细胞，形成K562，K562-V(空载体)，K562-T组。分别用PCR和Western blot 检测，PCR结果示K562-T组的MRNA明显高于其他两组，Western blot结果示：K562-T组有TFPI-2蛋白表达，其余两组未见蛋白表达。可见TFPI-2的表达能使K562细胞生长速度减慢，生长受到抑制，并且能够减弱K562细胞的侵袭能力，推测TFPI-2有抗肿瘤效应，能抑制肿瘤的增值和侵袭。

TFPI-2抑制恶性肿瘤侵袭性的机制探讨
目前TFP I-2在抑制恶性肿瘤侵袭性的作用还没有准确完整结论,但是在几个方面已经有了使人感兴趣的结果，值得进一步研究。
4.1 抑制MMPS： MMPS是一个蛋白酶家族，其作用是使结缔组织蛋白分解。能降解血管基底膜和内皮细胞的胞外基质，使内皮细胞从血管壁脱落下来而形成新的血管。MMPS的活性受到多水平调控，包括基因表达、基质金属蛋白酶抑制剂，TFPI-2等。【30】已有资料证明，多种恶性肿瘤的发生和转移与MMP的过度表达有关。MMP-2，MMP-9，MMP-7，MMP-14在人类胃癌中过度表达。特异性MMPS抑制因子可以恢复正常蛋白水解活性的平衡，TFP I-2通过抑制纤溶酶,间接抑制MMPs，从而阻止肿瘤的进一步发展及转移。
4.2 抑制VEGF的生成：血管内皮生长因子（VEGF）不论对于正常组织还是对于肿瘤组织内的血管生成均有非常重要的作用。促使血管内皮细胞发生有丝分裂、促进一些蛋白酶类重新改造细胞外结构以及增加血管的_性。胰腺癌中VEGF的表达增加。VEGF通过旁分泌及自分泌机制促进肿瘤发展。在人和动物模型中，VEGF的表达水平越高，预后越差。纤维肉瘤细胞株(HT21080)分泌的TFP I-2可以下调与血管新生有关的基因VEGF。【31】
……（未完，全文共14524字，当前仅显示3455字，请阅读下面提示信息。收藏《医学论文：TFPI-2与急性髓细胞白血病的研究进展》）