论文开题报告：蛋白核小球藻对氧氟沙星胁迫的响应

大学本科毕业论文(设计)开题报告
学院：化工学院　　　　　　　　　　　　　专业班级：09环境工程

课题名称 蛋白核小球藻对氧氟沙星胁迫的响应

1、本课题的的研究目的和意义：
蛋白核小球藻是一种低等植物，属于绿藻门、色球藻目、小球藻属，是本属植物中唯一具有蛋白核的种类。在小球藻的细胞内含有丰富的叶绿素，有吸附并排除毒素的作用，可以排出体内的_物质。实验证明小球藻有免疫调节作用，对大肠杆菌和病毒感染能起到抑制作用。氧氟沙星( oflo*acin，OFL*) 具有抗菌谱广、抗菌活性强的特点，且与其它抗菌药物无交叉耐药性。本实验研究了不同浓度的氧氟沙星对小球藻的生长状况、酶活性的影响，以期探讨氧氟沙星对蛋白核小球藻可能的毒性作用机制。
2、文献综述：
藻类植物一般位于食物链的最底端，作为水生生态系统的初级生产者，其种类的多样性和初级生产量会直接影响水生态系统的结构功能，在水生生态系统中具有重要意义，因而成为监测和评价水环境质量的
……（新文秘网https://www.wm114.cn省略691字，正式会员可完整阅读）……　
时间延长，斜生栅藻对OFL* 逐渐产生一定的耐受能力，使藻细胞恢复逐渐加快。吴银宝等[8]研究了另一种喹诺酮类抗生素———恩诺沙星对雨生红球藻的毒性，这两种抗生素的藻类毒性均随时间延长而减小，且氧氟沙星对藻类的毒性可能强于恩诺沙星，但毒性差异也可能是由藻种的差异所致。
目前许多学者认为藻类中富含丰富的酯类和甘油，是制备生物柴油的良好原料，并对一些藻进行了研究。Jin等人对小球藻进行了研究，得出结论小球藻可作为生物柴油的原料[9-10]。小球藻可耐高浓度的CO2和高温，可用于固定排放出来的CO2。小球藻属和栅藻属还可以去除培养基中多余的营养物氮和磷，可用于治理污水[11-12],它们的提取物也可作为食品添加剂加入到甜点、面条等食物中[13]。由此可见，小球藻有重要的利用价值，因此本文选取了这种藻作为实验藻。
本实验选取目前被广泛使用的抗生素——氧氟沙星，研究暴露于抗生素的蛋白核小球藻代谢的影响，以期为准确评估氧氟沙星对藻类的毒性以及筛选有效的生物标志物提供理论依据。

3、本课题的主要研究内容（提纲）和成果形式：
3.1 研究内容
通过向小球藻中添加不同浓度的OFL*，确定OFL*的半有效浓度，测定小球藻的生长状况以及某些酶的活性，试图探讨OFL*对蛋白核小球藻作用的机理。
3.1.1 关系曲线的绘制
根据血球计数板计数以及分光光度计测吸光度，得到水华微囊藻和吸光度之间的关系曲线。
3.1.2 确定OFL*的半有效浓度
通过分析不同浓度OFL*作用下的藻细胞密度-吸光度标准曲线计算藻细胞密度，进而计算生长抑制率，用概率单位-浓度对数法求出半数效应浓度。
3.1.3 不同浓度的OFL* 对蛋白核小球藻生物量的影响
通过分析不同浓度OFL*作用下小球藻光密度值，探讨OFL*对小球藻生长的影响。
3.1.4 不同浓度的OFL*对蛋白核小球藻抗氧化系统的影响
通过分析不同浓度OFL*作用下小球藻的超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT和丙二醛的变化，来探讨OFL*对小球藻抗氧化系统的影响。




3.2 成果形式
本课题研究的成果以数据、图表以及机理分析的形式进行表达，数据包括原始数据和计算分析获得的数据，然后用图表将关联的数据形象地表示出来，以便于对整个研究过程进行机理分析与讨论。






4、拟解决的关键问题：

本项实验的关键问题是探索出具有抑制作用的OFL*的半数效应浓度浓度，从而进一步分析抑制作用的机制。


5、研究思路、方法和步骤：
（1）研究思路



（2）方法和步骤
A. 关系曲线的绘制
用血球计数板显微计数法测定藻细胞密度，并于680nm波长处测定其吸光度，从而得到蛋白核小球藻藻密度与OD680的关系曲线。
B. 确定OFL*的半有效浓度
将不同浓度的OFL*分别加入到小球藻中，其中包括一个空白对照组和几个浓度组，每组设定三个平行，每天于24 h、48 h、72 h、96 h 取样测定吸光度。通过藻细胞密度-吸光度标准曲线计算藻细胞密度，进而计算生长抑制率，用概率单位-浓度对数法求出半数效应浓度。
C．不同浓度的OFL* 对小球藻生物量的影响
将不同浓度的OFL*分别加入到小球藻中，其中包括一个空白对照组和几个浓度组，每组设定三个平行，每天取样测定吸光度。细胞数的测定：同时取1 ml藻液用鲁格氏液固定，取0.1 ml在显微镜下用血球计数板计数。
D. 不同浓度的O ……（未完，全文共5525字，当前仅显示1940字，请阅读下面提示信息。收藏《论文开题报告：蛋白核小球藻对氧氟沙星胁迫的响应》）