论文开题报告：丝素/聚乳酸复合支架生物学评价

目录/提纲：……
1、稀释抗凝兔血的制备：取新鲜兔血，加2%草酸钾制备新鲜抗凝兔全血
4、凝血实验操作：在膜材和空白盖玻片上滴加兔血和氯化钙
三、复合支架生长因子释放能力测试：
1、溶菌酶标准曲线
2、丝素中溶菌酶载药量对支架中溶菌酶释放的影响
3、溶菌酶在不同载入模式下对支架中溶菌酶释放的影响
……

大学本科毕业论文(设计)开题报告
学院：化工学院 　专业班级：2009级 制药工程一班

课题名称 丝素/聚乳酸复合支架生物学评价

1、本课题的的研究目的和意义：
目的：通过细胞毒性检测、全身急性毒性反应、溶血试验及动态凝血时间试验等评价丝素/聚乳酸复合支架的生物安全性，为该材料临床应用的安全性提供有价值的理论依据。
意义：为丝素/聚乳酸复合支架作为生物材料的合理性提供根据，说明该复合支架具有良好的生物相容性，可用于临床推广。
2、文献综述（国内外研究情况及其发展）
聚乳酸是人体的可降解高分子合成聚合物材料，具有优异的力学性能和良好的生物相容性。丝素蛋白具有良好的生物相容性和可调生物降解率、细胞粘附性高等优点。丝素/聚乳酸复合材料制备的多孔支架，具有良好的细胞亲和性、生物相容性、机械强度和可调生物降解速率等一系列特点。
丝素-聚乳酸复合支架具有良好的生物相容性，根据国家标准用支架浸提液培养L929细胞，检测支架的细胞毒性。采用支架的浸提液作实验组，与对照组进行24小时急性全身反应。同时考察了溶血试验和动态凝血实验，在实验过程，可能由
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上接种一定数量的细胞，加以浸提液培养，观察细胞的生长情况。取生理盐水制备的支架浸提液，对小鼠尾端静脉注射，24小时内观察老鼠，称量小鼠体重。
1、浸提液的制备：做复合支架切片，用高糖培养基在37℃下浸提72 h，然后0.22μm滤膜灭菌。
2、细胞悬液的制备：取L929细胞培养，用血细胞计数板计数调节细胞浓度在1*106个/mL。将细胞悬液接种于96孔板上，培养箱中培养24后，弃去原液，向各组分别加入
不同浓度的浸提液200μL。
3、Alamar blue法检测：用酶联免疫检测仪测定吸光度，比较得到实验组的细胞相对增值率。
4、浸提液的制备：将多孔丝素/聚乳酸复合支架磨成粉末，以2.0 g材料加生理盐水10 ml的比例，37℃水浴箱72小时，制备标准浸提液，然后用0.22μm的滤膜过滤除菌。
5、急性反应：取小鼠60只，浸提液动物尾静脉注射，注射后24h、48h和72h称量体重变化，观察一般状态、毒性表现和死亡情况。
三、复合支架生长因子释放能力测试：
1、溶菌酶标准曲线。
2、丝素中溶菌酶载药量对支架中溶菌酶释放的影响。
3、溶菌酶在不同载入模式下对支架中溶菌酶释放的影响。
6、本课题的进度安排：
2013.2.15-2013.2.25 查阅国内外文献，确定论文方向，订购相关试剂。
2013.2.26-2013.3.15 学习实验仪器操作，解决实验过程中的关键问题。
2013.3.16-2013.4.29 开展实验工作。
2013.5.1-2013.5.15 整理实验数据，开展补充实验，完善论文。
2013.5.16-2013.5.26 撰写论文，准备答辩。
7、参考文献
[1] 张润, 邓政兴, 李立华, 周长忍. 用超临界CO2法制备聚乳酸三维多孔支架材料[J]. 材料研究学报, 2003, 17(06): 665-672.
[2] E. Reverchon, S. Cardea, C. Rapuano. A new supercritical fluid-based process to produce scaffolds for tissue replacement. Journal of Supercritical Fluids, 45 (2008), 365-373.
[3] D. J. Mooney, B. S. Kim, L. D. Harris, Open pore biodegradable matrices formed with gas foaming, Journal of Biomedical Materials. Res.42(1998), 396-402.
[4] 邢帅，夏亚一，袁凌伟，等．聚乳酸/丝素蛋白复合组织工程支架的制备及生物学性能的评价．吉林大学学报，2008，34（3）：405~410
[5] 张润, 邓政兴, 李立华, 周长忍. 用超临界CO2法制备聚乳酸三维多孔支架材料[J]. 材料研究学报, 2003, 17(06): 665-672.
[6] 葛建华, 王迎军, 郑裕东. 聚乳酸组织工程支架在SBF溶液中的降解和矿化性能[J]. 材料科学与工程学报, 2011, (01): 01-021.
[7] Hou C, Yuan Q, Huo D, et al. Investigation on clotting and hemolysis characteristics of heparin-immobilized polyether sulfones biomembrane. Journal of Biomedical Materials Research Part A, 2008, 85(3): 847~852
[8] Wang J, Hu W, Liu Q, et al. Dual-functional composite with anticoagulant and antibacterial properties based on heparinized silk ……（未完，全文共4525字，当前仅显示2285字，请阅读下面提示信息。收藏《论文开题报告：丝素/聚乳酸复合支架生物学评价》）