论文开题：厚朴酚和和厚朴酚的分离及结构修饰

大学本科毕业论文(设计)开题报告
学院：化工学院　　　　　　　　　　　　　专业班级：09制药工程1班　　

课题名称 厚朴酚和和厚朴酚的分离及结构修饰

1、本课题的的研究目的和意义：
本实验是厚朴酚及和厚朴酚衍生物抗抑郁活性的前期化学研究，研究快速拆分厚朴酚和和厚朴酚的方法，目的是将厚朴酚和和厚朴酚混合物分离，针对二者分子中的羟基官能团进行甲基化和酰基化结构修饰，并以光谱学方法检测反映产物的结构。
本实验意义主要有两点：一是分离方法采用C-18色谱柱，可以循环利用，环保；二是本实验所用的流动相为甲醇-水，并不涉及很多有机溶剂，毒性小。


2、 文献综述（国内外研究情况及其发展）：
厚朴酚与和厚朴酚是我国传统中药厚朴中的两个主要活性成分，具有抗菌、抗炎、抗肿瘤、肌肉松弛、降胆固醇和抗衰老、抗抑郁、抗焦虑等广泛药理作用 [1]。
研究表明，和厚朴酚对金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌有抑制作用[2]。和厚朴酚还具有十分显著地抗生龋齿菌的作用[3]。和厚朴酚还具有明显的抗真菌作用，其对新生隐球菌、白色念珠菌的最小灭菌浓度为25~100mg/L[4]。此外，Amblard等[5]的研究表明，和厚朴酚还具有明显的抗病毒作用。和厚朴酚是通过抑制细胞内PI3K/Akt信号转导通路介导对单核/巨噬细胞（U937/RAW264.7细胞）、淋巴细胞（脾脏淋巴细胞及CTLL-2细胞）抗炎作用
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]。
有学者采用硅胶层析分离技术和重结晶的方法对厚朴酚及和厚朴酚的混合物进行分离、纯化，得到了高纯度的厚朴酚及和厚朴酚单体[18]。后又有学者采用硅胶柱层析法分离纯化厚朴中的厚朴酚与和厚朴酚，采用不同系统的洗脱液进行洗脱，以厚朴酚的纯度为考察指标，筛选最佳洗脱系统，得到结论是石油醚：丙酮的洗脱效果最佳[19]。
一般来说，生物样本中厚朴酚与和厚朴酚浓度低，组成复杂，因此，建立一种准确、灵敏、重现性好的分析方法对于其药代动力学研究非常重要。目前，厚朴酚与和厚朴酚的主要检测方法有电化学法[20]、色谱法（[21]-[23]）和光谱法（[24]、[25]）。
我国药典把薄层和高效液相色谱方法检测厚朴酚与和厚朴酚作为厚朴药材质量的控制标准[26]。但色谱法通常需要较长的分离分析时间，与之相比，光谱法具有快速的特点。厚朴酚与和厚朴酚是同分异构体，分子内均含有两个酚羟基，但二者光酸性不同[27]，这为用荧光法（FL）同时测定提供了基础。于是利用厚朴酚与和厚朴酚的光酸性的不同，建立同时检测厚朴药材中这两种主要成分的荧光方法。通过对样品的测定发现，与色谱方法一样，甲醇提取液不需要进一步纯化处理，可以直接用于论文建立的荧光法对厚朴酚与和厚朴酚的测定。通过与HPLC方法的对照，证明荧光光谱法的精确度和准确度皆能满足分析要求。
也有学者建立了一种用高效液相色谱（HPLC）荧光检测法同时测定中成药中厚朴酚与和厚朴酚含量的新方法[28]。该方法灵敏度高、选择性好、简便、易重复，为香砂养胃丸、藿香正气软胶囊、国公酒中厚朴酚与和厚朴酚的测定提供了有效的方法。
由于毛细管电泳具有高分辨率、高灵敏度、快速、低耗样量、低污染的特点，毛细管电泳安培检测（CE-AD）克服了传统紫外检测灵敏度低的缺点，对分离电活性物质具有灵敏度高，选择性好、线性范围宽、设备简单、成本较低的特点。所以此方法具有很好的应用前景。因此进行实验研究拟拓展用于同时检测厚朴酚与和厚朴酚的毛细管电泳安培检测方法。并用于市售中药厚朴，中成药藿香正气水和保济丸中厚朴酚与和厚朴酚的分离检测，结果令人满意[29]。
此外，使用ph=8.93的KH2PO4-NaOH缓冲液（0.025mol/L），根据混合物含量测定的原理，在289.4nm和316.4nm处测定溶液吸光度来测定厚朴酚和和厚朴酚的含量，在517nm处考察厚朴酚与和厚朴酚清除DPPH•的活性，建立了同时测定厚朴酚与和厚朴酚含量的紫外分光光度法，初步考察了二者的_基清除活性。DPPH•可作为二者抗氧化活性的研究方法[30]。


3、 本课题的主要研究内容（提纲）和成果形式：
本课题主要研究如何用尽可能简洁环保的方法分离厚朴酚和和厚朴酚，如何对厚朴酚和和厚朴酚进行结构修饰，以及对其结构修饰后是否还有抗抑郁作用。
成果形式：纯净的厚朴酚，纯净的和厚朴酚，甲基化的厚朴酚，酰基化的厚朴酚，甲基化的和厚朴酚，酰基化的和厚朴酚。


4、拟解决的关键问题：
厚朴酚与和厚朴分为同分异构体，它们是厚朴中活性最强的物质，而且二者药理活性也非常相似，因此二者较难分离。前人学者已经采用一些方法将二者分离纯化，但所用有机溶剂较多，所用材料也不能重复利用。所以本实验采用可循环的C-18色谱柱分离，用甲醇：水系统做洗脱液，较经济环保。
5、研究思路、方法和步骤：
思路：厚朴酚与和厚朴分为同分异构体，它们是厚朴中活性最强的物质，而且二者药理活性也非常相似，因此二者较难分离。前人学者已经采用一些方法将二者分离纯化，但所用有机溶剂较多，所用材料也不能重复利用。所以本实验采用可循环的C-18色谱柱分离，用甲醇：水系统做洗脱液，较经济环保。另外，厚朴酚与和厚朴酚都有抗抑郁作用，那么如果将其结构修饰，是否仍然有抗抑郁作用甚至效果更好呢？于是展开了实验。
方法：采用C-18色谱柱，用甲醇：水系统为洗脱液，将厚朴酚和和厚朴酚混合物进行分离，得到二者的纯净物单体。然后分别对厚朴酚和和厚朴酚进行结构修饰，得到甲基化物和酰基化物。
步骤：（1）摸索条件，先用称取少量混合物，采用不同比例不同系统的洗脱液，找到最佳比例的最佳洗脱液。（2）分离纯化，采用效果最佳的洗脱液对混合物进行分离并纯化。（3）对厚朴酚单体进行甲基化和酰基化。（4）对和厚朴酚单体进行甲基化和酰基化。


6、本课题的进度安排：
（1）9月20日-9月30日 摸索条件，先用称取少量混合物，采用不同比例不同系统的洗脱液，找到最佳比例的最佳洗脱液。
（2）10月10日-11月10日 分离纯化，采用效果最佳的洗脱液对混合物进行分离并纯化。
（3）11月11日-11月15日 对厚朴酚单体进行甲基化和酰基化。
（4）11月15日-11月20日 对和厚朴酚单体进行甲基化和酰基化。




7、参考文献：
[1] 王立青，江荣高，陈蕙芳.中草药,第36卷第10期
[2] 林桂云，谢生发，谢 ……（未完，全文共7746字，当前仅显示2720字，请阅读下面提示信息。收藏《论文开题：厚朴酚和和厚朴酚的分离及结构修饰》）