论文开题报告：基于RAPD的三角梅属种质资源遗传多样性研究

大学本科毕业论文(设计)开题报告
学院：　化工学院　　　　　　　　　　　　专业班级：　08园艺（观赏园艺）　　　　

课题名称 基于RAPD的三角梅属种质资源遗传多样性研究

1、本课题的的研究目的和意义：
三角梅属（Bougainvillea）隶属于紫茉莉科(Nyctaginaceae)，最早由法国大探险家Louis-antoine de Bougainville于1766-1769年在南美洲的巴西发现并以他的名字命名。该属仅有3个种具有观赏价值，但因其花色多样，在园林中广泛应用。全世界约有300个三角梅品种，我国保存的品种仅有80多个，且具有极高观赏价值的杂交三角梅品种较少。
RAPD作为一种分子标记，其操作简便、快速、费用少，在观赏植物上己被用于遗传多样性方面的研究。通过文献研究，发现过去和现在对三角梅的研究主要集中在栽培技术、组织培养等方面，分子生物学方面的研究几乎为空白，居群的遗传关系也不明了。对三角梅遗传演化、种质资源评价、遗传多样性等方面研究也较少。
本实验通过对
……（新文秘网https://www.wm114.cn省略720字，正式会员可完整阅读）……　
广泛的应用。而且也是“核心种质”筛选的一个重要工具。
RAPD技术作为一种分子标记具有其独特的优点，其操作简便、快速、费用少、安全性好，对模板DNA的需求量少、质量要求低。分子标记的发展使得在DNA水平上进行遗传变异的研究成为可能，并广泛应用于遗传多样性和亲缘关系分析、品种分类与鉴定研究、发现和检测突变体及指纹图谱和遗传图谱的构建。
国外对于三角梅的研究文章较少，在分子水平上的可查阅的有Richa Srivastava发表的一篇三角梅RAPD研究的文章。在国内的研究中，王芬芬根据厦门植物园收集保存的近30个品种，可分为三类，分别为三角梅 (Bougainvilleaspeetabilis)、光叶三角梅(Bougainvilleaglabra)和杂交三角梅 (Bougainvilleabuttiana)。而洪项目认为我国自 1872年引种栽培，现共有4个原生种，分别为光叶三角梅、红花三角、秘鲁三角梅和密节三角梅。
综上所述，近年来我国学者对三角梅的研究多侧重于组织培养、快速繁殖和栽培技术方面，而对三角梅的品种分类及其遗传多样性却鲜有报道。

3、 本课题的主要研究内容（提纲）和成果形式：
本实验采用三角梅48个品种为研究对象，来探讨三角梅属植物的遗传多样性。目的在于通过对48个品种的三角梅的RAPD分析，探索不同品种三角梅间的遗传多样性，为三角梅属植物的分类和品种鉴定提供参考依据，同时也为三角梅属植物的引种及新品种选育提供理论依据和应用基础。主要内容如下：
（1）建立三角梅属48个品种的RAPD分析体系，对48个品种的三角梅的核DNA遗传多态性、聚类树进行分析；
（2）在分子标记的基础上，根据所得到的分子数据，并结合相关资料对三角梅的遗传多样性进行综合分析。
成果形式：毕业论文

4、拟解决的关键问题：
（1）优化CTAB法提取三角梅48个品的DNA。
（2）建立RAPD反应体系
（3）优化RAPD-PCR反应体系
（4）优化琼脂凝胶电泳系统
5、研究思路、方法和步骤：
思路：
参考他人文献，根据查阅的资料设计适合三角梅的RAPD反应体系，接着进行预实验，检测实验的合理性，并进行适当调整，紧接着进行实验，并做实验补充，然后处理数据。
方法：
本实验采用随机扩增多态性 (RAPD)技术对三角梅遗传多样性进行研究，RAPD分子标记建立在PCR基础之上。通过使用一系列具有10个碱基的单链随机引物，对基因组的全部NDA进行PCR扩增，然后经琼脂凝胶电泳分离，通过EB染色就可检测被扩增的DNA的多态性。为了使实验结果更准备，本实验采用单因素实验和正交实验相结合，对影响PCR扩增效果的一些因素进行筛选和优化。

步骤:
三角梅属48个品种的嫩叶采集 → 核基因组的DNA的提取（CTAB法） → 基因组DNA组质量检测 → 引物的筛选 → RAPD扩增反应 → PCR产物的检测 → 实验数据统计及分析 → RAPD分析三角梅的遗传多样性

6、本课题的进度安排：
2011.09 查阅文献，确定方法并进行预实验以确定实验反应体系。
提取三角梅属植物的DNA
2011.10利用单因素和正交实验进一步优化实验体系。
引物的初步筛选
2011.11 对筛选后的引物进行RAPD-PCR扩增及产物检测。
2012.01 对实验效果较不佳的引物重新进行RAPD-PCR扩增及产物检测。
2012.02 实验数据统计及分析
2012.03-2012.05 写毕业论文和准备答辩材料

7、参考文献：
[1]刘晓宇.RAPD分子标记技术概述及应 ……（未完，全文共4000字，当前仅显示2020字，请阅读下面提示信息。收藏《论文开题报告：基于RAPD的三角梅属种质资源遗传多样性研究》）