毕业论文：蜂胶的免疫增强作用及在疫苗佐剂中的应用综述

毕业论文：蜂胶的免疫增强作用及在疫苗佐剂中的应用综述

摘要： 蜂胶作为一种天然的生物活性物质，化学成分复杂，具有广泛的生物学作用，特别在抗菌、抗病毒及增强机体免疫功能等方面具有显著的生物活性，是疫苗佐剂的良好原材料。相对于传统佐剂，蜂胶具有绿色天然，安全可靠，副作用小，来源丰富，成本低廉的优势。因此，近年来，对于蜂胶的免疫增强作用及其在疫苗佐剂中的应用研究不断深入，并在畜禽用疫苗的实验中取得了满意效果，为新型有效疫苗的研制和开发提供了新的发展思路。

关键词 蜂胶；疫苗；佐剂；免疫增强；

1. 前言
1.1 现状
大多数疫苗中所含的醇化抗原，不能自行引起强大的免疫应答，存在抗原性弱、直接接种该类疫苗只能引起缓慢的弱免疫应答的问题，无法达到有效预防接种目的。对于抗原性更弱的新一代基因工程疫苗如重组亚单位和粘膜疫苗，这个问题更为严重。鉴于在分子水平上改造抗原提高其抗原性的方法，在成本效率层面上都难以让人满意，目前的解决方案是在疫苗中加入免疫佐剂提高疫苗整体的抗原性，从而增强免疫应答。
1.2 常用疫苗佐剂及问题
目前国内外广泛使用的铝胶类等无机物佐剂、油乳类化学性免疫增强剂以及微生物来源佐剂有副作用大、局部刺激强、致癌、制备和使用不便、不能充分提高弱杭原的抗原性等弊端。因此，研制高效、低毒的新型免疫增强剂已成为亟待解决的问题
……（新文秘网https://www.wm114.cn省略917字，正式会员可完整阅读）……　
叙述是：“主治痈肿不消，为末，醋调涂之，干更易之。不入服食，药性疗疗肿疮毒”[ 、 ]。由于蜂胶的化学成分复杂，分离和鉴定技术落后，在相当长的一段时间内没有得到很好的研究与开发利用。直到1909年，亚历山大罗夫发表了《蜂胶是药》的论文后，蜂胶才真正引起了人们的重视。在随后的时间里，人们对蜂胶的研究和应用逾加深入和广泛[ ]。
2.4 主要成分
蜂胶是蜜蜂用来防护、抵御病虫害和病原微生物入侵巢房的御敌物质，同时也是作为修补巢房和内环境消毒杀菌的一种特殊物质，应用气相色谱-质谱联机等现代分析技术，从蜂胶中分析鉴定出100多种化学成分[ ]，主要有黄酮类化合物(包括黄酮、黄酮醇和黄烷醇)、萜烯类、有机酸类化合物、醛、醇类化合物等。蜂胶的最大特点是含有丰富的黄酮类和萜烯类化合物。蜂胶中的黄酮类化合物具有抗菌、杀毒、消炎、止痛、降血脂、促进组织再生和增进机体免疫能力等功效[ ]。鉴于黄酮类化合物在蜂胶中有效成分中占的比例较高，且含量测定容易，目前常用黄酮类化合物的含量来代表蜂胶有效成分的含量，因此黄酮类化合物含量是蜂胶制品最主要的质量控制指标[ 、 ]。复杂的化学成分，决定了蜂胶有广泛的生物学作用，如广谱抗病毒、抗细菌、抗霉菌、抗肿瘤、消炎、增强机体免疫功能和促进组织再生等作用[ ] [ ]。


3. 蜂胶的免疫增强作用
3.1 总体作用
蜂胶的免疫增强功能表现在免疫防御、免疫自稳、免疫监视三个方面，即机体对病菌、病毒的抗感染能力，识别和清除自身衰老组织细胞的能力，杀伤和清除异常突变细胞、抑制恶性肿瘤生长的能力。
蜂胶本身虽不具有抗原特性，但它具有免疫增强作用，能增加抗体产生，使血清蛋白和丙种球蛋白含量提高，提高白细胞和巨噬细胞吞噬能力，提高抗体的特异性和非特异性免疫力[ ]。
3.2 研究证据
上世纪60年代，苏联喀山兽医学院就通过对大、小白鼠，家兔，猪，牛犊的试验证明，应用蜂胶或配合抗原引入机体能增强机体的免疫功能。基瓦尔金娜等等证明，蜂胶具有明显增高血清丙种球蛋白(免疫球蛋白)的效应，同时具有活化补体，增强巨噬细胞活力的作用。此后，她们用肠炎沙门氏菌制备的完全抗原免疫大白鼠，分组观察证明，蜂胶合并抗原注入动物机体，能引起较强的浆细胞反应和刺激局部与远区淋巴结的抗体生成105106。用蜂胶作为佐剂注射的大白鼠，其局部淋巴细胞增生比用皂素作佐剂的或单纯抗原组强3.7-6倍，蜂胶组大白鼠血清凝集素滴度比其其它组高3-4倍。巴拉鲁金纳指出单用沙门氏菌抗原免疫家兔时，在免疫后7天，血清中己经能检测出抗体，2l天抗体滴度达到最高峰，此后降至维持水平，此水平至少维持65天。
沈志强等以蜂胶为佐剂成功研制禽霍乱蜂胶灭活疫苗，免疫7天后产生坚强免疫力，近期保护率达10%，免疫期长达6个月以上。并在以后的研究中证明，蜂胶可增强机体免疫反应、激活与保护免疫器官，是优良的免疫佐剂，他认为蜂胶对机体免疫系统具有广泛的作用，既可增强体液免疫功能也可增强细胞免疫功能，对胸腺、脾脏及免疫系统具有有益的影响，能促进抗体的生成，增强巨噬细胞的吞噬能力和自然杀伤性细胞的活性。
Dimov等[ ]研究了蜂胶水溶性物质的免疫调节作用，发现对金黄色葡萄球菌和白色念球菌感染具有良好的免疫调节作用。
Ivanovska等对蜂胶的机体体内免疫调节作用进行了一系列的研究，结果发现:苯乙烯酸和咖啡酸对红血球溶解具有良好的抑制作用，无论对机体损伤造成的免疫功能低下还是本身原有的免疫功能缺乏都有很好的效果；其对革兰氏阴性菌感染的免疫调节主要是通过提高巨噬细胞活力，增强其吞噬功能来完成的。
李淑华等用单克隆抗体技术检测试验小鼠药物处理前后T细胞总数及亚群变化，并用MTT法检测T细胞增殖研究，结果显示，蜂胶乙醇提取物（EEP）能促进Con A诱导的淋巴细胞增殖，增加T细胞总数并调整T细胞亚群紊乱，表明EEP对免疫功能低下小鼠细胞免疫功能具有免疫刺激和调节作用。
于晓红等试验结果证明，蜂胶能够增强免疫功能低下小鼠的抗体生成细胞功能，提高溶血素含量，增强单核吞噬细胞功能[ 、 ]。


4. 在佐剂中的作用
4.1 佐剂概述
佐剂“adjuvant”一词来自拉丁文“adjuvare”，意思是帮助，在免疫学中是指与抗原混合后注射动物可增加抗原的免疫原性，起辅佐抗原的作用，并增强或调节抗原体液和细胞免疫应答。佐剂通过激活抗原递呈细胞(APC)以表达共刺激分子和免疫效应因子，没有佐剂，纯化蛋白或基因工程肽等弱抗原不能诱导机体产生有效的免疫保护反应。世界范围内有多个实验室都在寻找理想的抗原佐剂[ ]。理想的佐剂不仅能增强免疫反应，还能使宿主获得最佳的保护性免疫。

4.2 传统佐剂
4.2.1 铝胶佐剂
铝盐佐剂包括硫酸钾铝、磷酸铝、按明矾、钾 ……（未完，全文共9435字，当前仅显示2577字，请阅读下面提示信息。收藏《毕业论文：蜂胶的免疫增强作用及在疫苗佐剂中的应用综述》）